fa بهینه سازی تاثیر غلظت محیط کشت، ساکارز و pH بر تولید ریشه‌های مویین گیاه شابیزک (Atropa belladonna L.) با استفاده از روش سطح پاسخ (RSM) در شرایط درون شیشه ای بیوتکنولوژی و کشت بافت Biotechnology and Tissue culture پژوهشي Research <div style="text-align: justify;"><span style="font-size:11pt"><span style="line-height:normal"><span style="tab-stops:14.2pt"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span style="font-family:Calibri,sans-serif"><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">بهینه‌سازی محیط کشت تولید ریشه‌های مویین از نظر ترکیب‌ها و نوع مواد تشکیل دهنده محیط کشت جهت رشد و بهینه‌سازی زیست توده ضروری است.</span></span> <span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">بزرگترین مزیت ریشه‌های مویین این است که در مقایسه با گیاه مادری، اغلب توان بالایی در تولید متابولیت‌های ثانویه دارند. </span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">در این پژوهش، ریشه‌های مویین تراریخته در گیاه شابیزک بواسطه تلقیح با باکتری </span></span><i><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">Agrobacterium rhizogenes</span></span></i><b> </b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">سویه </span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">A7</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> تولید شدند. تایید مولکولی ریشه‌های مویین بوسیله </span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">PCR</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> با استفاده از آغازگر‌های اختصاصی ژن </span></span><i><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">rol </span></span></i><i><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">B</span></span></i> <span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">انجام گرفت. با استفاده از کدبندی‌های روش سطح پاسخ </span></span><span lang="FA" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">(</span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">RSM</span></span><span lang="FA" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">)</span></span> <span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">اثر سه غلظت محیط کشت پایه مایع (</span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">MS</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">، </span></span>&nbsp;<span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">MS</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">2/1 و </span></span>&nbsp;<span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">MS</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">4/1) با غلظتهای مختلف ساکارز (15، 30 و 45 گرم بر لیتر) و سه سطح </span></span>&nbsp;<span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">pH</span></span> <span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">(5/5، 8/5 و 1/6) بر رشد ریشه‌های مویین بررسی شد.</span></span> <span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">وزن‌تر و خشک ریشه‌های مویین بعد از گذشت 4 هفته اندازه‌گیری شد. نتایج حاصل از روش‌</span></span> <span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">سطح پاسخ نشان داد که بیشترین وزن تر و خشک ریشه‌های مویین در محیط کشت با غلظت 56/0 (</span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">MS</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">2/1</span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span cambria="" math="" style="font-family:">&cong;</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">) همراه با 30 گرم بر لیتر ساکارز</span></span> <span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">&nbsp;و</span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">pH</span></span> &nbsp;<span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">8/5 به‌دست آمد. در شرایط بهینه ارزش مطلوبیت هر سه فاکتور محیط کشت، ساکارز و </span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">pH</span></span><span style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> ،</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">990/0 و وزن‌تر و خشک به‌ترتیب 58/8 و 317/0گرم بود.</span></span> <span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">بر اساس نتایج </span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">GC/MS</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> میزان آلکالوئید آتروپین در ریشه‌های مویین رشد یافته در مناسب‌ترین &nbsp;محیط کشت حدود 88/6 درصد بود.</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span style="font-family:"B Nazanin""></span></span></span></span></span></span></span></span></div> <div style="text-align: justify;"><span style="font-size:11pt"><span style="line-height:normal"><span style="tab-stops:14.2pt"><span style="font-family:Calibri,sans-serif"><span style="font-size:12.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">Optimization of the culture medium of hairy roots in terms of the composition and type of ingredients in the medium is essential for proper growth and optimal biomass production. The greatest advantage of culturing Hairy roots is that they are often capable of producing secondary metabolites compared to the mother plant. In this research, transgenic hairy root induction was established through the mediation of the A7 strain of <i>Agrobacterium rhizogenes</i>. Molecular confirmation of hairy roots was done by PCR using <i>rol</i>B gene-specific primers. With response surface methodology (RSM) coding, the effect of three types of basal liquid MS media (MS, &frac12; MS and &frac14; MS) with different sucrose concentrations (15, 30, and 45 g / L) and three pH levels (5.5, 5.8 and 6.1) on the growth of hairy root was investigated. The fresh and dry weight of hairy roots was measured after 4 weeks. The obtained results of response surface methods showed that the highest dry weight of hairy roots in the culture medium with a concentration of 0.56 of MS (</span></span><span style="font-size:12.0pt"><span cambria="" math="" style="font-family:">&cong;</span></span><span style="font-size:12.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""> 1/2MS), 30 g of sucrose, and pH of 5.8. In optimum conditions, the utility value was 0.990, and the fresh and dry weight of hairy roots, was 8.58g and 0.317g, respectively. According to GC/MS results, the amount of atropine alkaloid in hairy roots grown in optimum culture medium was about 6.88%.</span></span></span></span></span></span></div> آتروپین, آگروباکتریوم رایزوژنز, ریشه‌ مویین, روش سطح پاسخ, محیط کشت Atropine, Agrobacterium rhizogenes, hairy root, Response Surface Methodology, Culture medium 661 674 http://journal-irshs.ir/browse.php?a_code=A-10-763-1&slc_lang=fa&sid=1 Mohammad Fattahi محمد فتاحی mohamadfattahi@yahoo.com 10031947532846009073 10031947532846009073 Yes Urmia University دانشگاه ارومیه Behnam Karjo بهنام کارجو behnamkarjo@gmail.com 10031947532846009074 10031947532846009074 No Urmia University دانشگاه ارومیه